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牛干細胞因子(SCF)ELISA檢測試劑盒
一、牛干細胞因子(SCF)ELISA檢測試劑盒實驗原理
12月24日消息,上海臻科報道:牛干細胞因子(SCF)ELISA檢測試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被牛干細胞因子(SCF)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛干細胞因子(SCF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
二、牛干細胞因子(SCF)ELISA檢測試劑盒產品優(yōu)勢
1.品種齊全、質量可靠、靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡便。
2.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
3.重復性:板內變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
4.同城(上海)需要代測可免費上門取樣,享送貨上門的服務。
5.根據(jù)客戶需求可以根據(jù)客戶的要求定制elisa試劑盒。
6.臻科生物可提供全方位的售前、售中、售后技術支持,為您解決實驗過程中遇到的問題。
三、牛干細胞因子(SCF)ELISA檢測試劑盒標本要求
1.血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。Zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
四、試劑盒組成
名稱 |
96孔配置 |
48孔配置 |
備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×8條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 |
6mL |
3mL | 無 |
檢測抗體-HRP |
10mL |
5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 |
25mL |
15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A |
6mL |
3mL | 無 |
底物B |
6mL |
3mL | 無 |
終止液 |
6mL |
3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
五、操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
六、注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5. 封板膜只限一次性使用,避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。底物請避光保存
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
七、關于牛干細胞因子(SCF)ELISA檢測試劑盒承諾
公司長期與各大高校、醫(yī)院及權威科研單位保持著良好的合作關系,公司的產品質量及服務態(tài)度得到了他們的一致認可。臻科生物本著客戶至上的原則為客戶提供優(yōu)質產品,公司承諾產品有任何質量的問題免費包退換(非人為因素造成的)。公司提供免費代測服務,并且承諾收到樣本七個工作日出結果,確保數(shù)據(jù)的準確性。詳情可聯(lián)系我司客服了解。
更新時間:2024/8/7 14:45:15
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